到底用什么来鉴定DNA 甲基绿还是二苯胺
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发布时间:2022-04-20 09:06
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好二三四
时间:2022-09-11 16:52
鉴定dna的试剂是二苯胺,原理是当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。DNA遇二苯胺生成蓝色。
甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。所以DNA可用甲基绿染色,用二苯胺鉴定。而RNA可以用吡罗红检测。
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时间:2023-08-12 23:07
用甲基绿来鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。
甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水,显蓝绿色。为碱性染料,它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。
又称双绿SF。绿色晶体,具金*光泽,或淡绿色粉末。溶于水,呈蓝绿色。微溶于乙醇,不溶于乙醚、戊醇。
扩展资料:
甲基绿操作注意事项:
1、操作人员应经过专门培训,严格遵守操作规程。
2、操作处置应在具备局部通风或全面通风换气设施的场所进行。
3、避免眼和皮肤的接触,避免吸入蒸汽。
4、远离火种、热源,工作场所严禁吸烟。
5、使用防爆型的通风系统和设备。
6、如需罐装,应控制流速,且有接地装置,防止静电积聚。
7、避免与氧化剂等禁配物接触。
8、搬运时要轻装轻卸,防止包装及容器损坏。
9、倒空的容器可能残留有害物。
10、使用后洗手,禁止在工作场所进饮食。
11、配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。
参考资料来源:百度百科-甲基绿
参考资料来源:百度百科-脱氧核糖核酸
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时间:2023-08-12 23:07
二苯胺
甲基绿是大学生物里鉴定细胞核的染色剂,因为它能和DNA、RNA发生显色反应,不过高中生物里只提到以加二苯胺试剂沸水浴的方法鉴定DNA,因为沸水浴条件下DNA遇二苯胺试剂会变蓝
甲基绿是用来找DNA的分布的!不是用来鉴定的!大家都这么说!不能用甲基绿代替二苯胺的原因是:(1)甲基绿本身是蓝绿色的,(2)当用于细胞的染色时,甲基绿为碱性染料,它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。所以用甲基绿不是很准确,而且因为其本身有颜色,就算没有DNA,它也会是蓝绿色。而二苯胺和DNA的反应原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而呈现蓝色(溶液呈浅蓝色)。鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。因此二苯胺鉴定DNA更准确
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时间:2023-08-12 23:08
DNA的鉴定一般用两种试剂:甲基绿和二苯胺
甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果。碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后,由于DNA、RNA对染料具有的亲和力不同, 而使这两种染料对两类核酸具有了选择性。 DNA被甲基绿染成绿色,RNA被哌洛宁染成红色, 这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来。
二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。
至于步骤,我以鸡为例,简单说下吧
(1)应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤。本步骤直接决定提取的核物质的多少及实验结果。教师应给予非常关注。
(2)溶解细胞核内DNA。加2 mol/L的NaCl溶液并用玻棒搅拌。
(3)析出DNA黏稠物并过滤。关键步骤:注意①注蒸馏水要慢,防过量而使DNA重新溶解(把握浓度达0.14 mol/L)。②轻轻沿同一方向搅拌,有利于DNA析出、附着、缠绕。
(4)再溶解DNA黏稠物并过滤。用浓度为2 mol/L的NaCl溶液。
(5)提取含杂质较少的DNA。用预冷的95%的酒精。因其①可抑制核酸水解酶活性,防止降解。②降低分子运动,易析出沉淀。③低温利于增加DNA柔韧性,减少断裂
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时间:2023-08-12 23:08
DNA的鉴定一般用两种试剂:甲基绿和二苯胺
甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果.碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后,由于DNA、RNA对染料具有的亲和力不同, 而使这两种染料对两类核酸具有了选择性. DNA被甲基绿染成绿色,RNA被哌洛宁染成红色, 这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来.
二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色).
至于步骤,我以鸡为例,简单说下吧
(1)应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤.本步骤直接决定提取的核物质的多少及实验结果.教师应给予非常关注.
(2)溶解细胞核内DNA.加2 mol/L的NaCl溶液并用玻棒搅拌.
(3)析出DNA黏稠物并过滤.关键步骤:注意①注蒸馏水要慢,防过量而使DNA重新溶解(把握浓度达0.14 mol/L).②轻轻沿同一方向搅拌,有利于DNA析出、附着、缠绕.
(4)再溶解DNA黏稠物并过滤.用浓度为2 mol/L的NaCl溶液.
(5)提取含杂质较少的DNA.用预冷的95%的酒精.因其①可抑制核酸水解酶活性,防止降解.②降低分子运动,易析出沉淀.③低温利于增加DNA柔韧性,减少断裂
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时间:2023-08-12 23:09
甲基绿是用作对细胞内DNA进行染色,而二苯胺是对DNA进行胞外鉴定,在高中阶段甲基绿常与吡罗红混合使用,同时使细胞内DNARNA显不同颜色,从而观察分布,而二苯胺常用与粗提取DNA的鉴定,在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈蓝色,如果题目中,只是问了鉴定,应该是二苯胺