蛋白互作专题GST pull-down

发布网友 发布时间：2024-09-08 15:38

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热心网友 时间：2024-09-13 13:37

蛋白功能研究正成为当前学术界的热点之一，蛋白间相互作用对细胞生命活动至关重要，它们通过形成复杂的功能性复合体参与信号级联反应，细胞及个体的生命活动。研究蛋白间相互作用的方法多样，如酵母双杂、双分子荧光互补、免疫共沉淀和GST pull-down等。

GST pull-down技术结合了GST融合蛋白的独特性质，能够与谷胱甘肽特异性结合。GST作为表达标签，不仅促进原核表达蛋白的正确折叠和可溶性表达，还被广泛用于体外验证蛋白间的直接相互作用。

普健生物提供从GST融合蛋白制备到GST pull-down的一站式服务，此外还提供Biacore、SPR等技术，以满足不同需求，分析分子间的相互作用。

GST pull-down技术原理包括以下步骤：首先获得带有GST标签的融合蛋白，然后将其亲和到谷胱甘肽层析柱上，获取可能与融合蛋白发生相互作用的蛋白，这些蛋白被亲和到层析柱上，随后切掉标签，洗脱得到相互作用的蛋白。

该技术主要用于验证两种蛋白之间是否存在直接相互作用，主要用于证实已知蛋白之间的相互作用和寻找能与已知蛋白发生相互作用的未知蛋白。

实验操作的关键在于减少假阳性出现，包括使用高纯度的GST融合蛋白，选择合适的载体和表达条件，以及控制GST标签的影响。同时，DNA和RNA的干扰也需谨慎处理。

蛋白间相互作用研究方法不断发展，GST pull-down、Biacore、SPR等技术在分子间相互作用分析中发挥重要作用。普健生物凭借丰富的蛋白表达经验，可满足不同需求。

研究蛋白互作的数据库提供了宝贵资源，包括MINT、STRING、HPRO、BioGRID、DIPOS、DIP Database、PPIM、The Arabidopsis Interactions Viewer和PIPs等，这些数据库在促进学术研究方面发挥了重要作用。